2.柜內不放與本次實驗無關的物品，操作前應將實驗所需的全部物品移入安全柜，避免操作中雙臂頻繁穿過氣幕破壞氣流；并且在移入前用70%酒精擦拭表面消毒，消毒工作臺面。柜內物品擺放應做到清潔區(qū)、半污染區(qū)與污染區(qū)分開，在柜內擺放的物品應該盡量呈橫向*字擺開，操作中物品取用方便，避免回風過程中造成交叉污染。物品應盡量靠后放置，但不得擋住氣道口，以免干擾氣流正常流動。

　　3.打開風機5～10分鐘，待柜內空氣凈化并氣流穩(wěn)定后再進行實驗操作。將雙臂應該垂直地緩緩伸入二級生物安全柜內，至少靜止1分鐘，使柜內氣流穩(wěn)定后再進行操作，柜內操作時手應該盡量平緩移動。操作中如確實需要拿出手臂或物品進入，也應垂直地緩緩進出，且可能接觸感染物品，要對手套及手臂進行表面消毒。

　　4.避免震動原則：柜內盡量避免震動儀器的使用，因為震動會使得積留在濾膜上的顆粒物質抖落，導致操作室內部潔凈度降低，同時如果在前操作面平衡失敗還會引起安全柜對操作者的污染。如必須則放置在靠近柜內后壁1/3處，潔凈的物品應放置在距離產生氣溶膠器皿至少150mm外。

　　5.不同樣品柜內移動原則：操作和移動物品時應按照從清潔區(qū)（低污染性物品）到污染區(qū)（高污染性物品）進行，以避免交叉污染。為防可能濺出的液滴，可在臺面上鋪*用消毒劑浸泡過的毛巾或紗布，但不能覆蓋住安全柜格柵。

　　6.二級生物安全柜內操作期間，嚴禁使用酒精燈等明火，以避免產生的熱氣流干擾柜內氣流穩(wěn)定；且明火使用過程中產生的細小顆粒雜質將被帶入濾膜區(qū)域，這些高溫雜質會損傷HEPA濾膜。無法避免*定需要使用的時候，宜使用低火苗的本生燈。允許使用微型電加熱器或紅外滅菌器，好使用*次性無菌接種環(huán)。

　　7.工作時盡量減少背后人員走動以及快速開關房門，以防止安全柜內氣流不穩(wěn)定。

　　8.在實驗操作時，不可打開玻璃視窗，應保證操作者臉部在工作窗口之上。操作盡量工作臺中央，稀釋病毒樣本必須在生物安全柜中,不可吹打,在旋渦混勻器上混勻,吹打產生的氣溶膠易造成整個試驗環(huán)境的污染；將盛有樣品的試管或試盤的表面密封以防止下沉氣流侵襲樣品。

　　9.二級生物安全柜應定期進行檢測與保養(yǎng)，以保證其正常工作。工作中*旦發(fā)現安全柜工作異常，應立即停止工作，采取相應處理措施，并通知管理員。

　　10.允許全天24小時工作。連續(xù)工作有助于控制實驗室中灰塵和顆粒的水平；將二級生物安全柜*直維持運行狀態(tài)。工作后，關閉玻璃窗，保持風機繼續(xù)運轉10～15分鐘，同時打開紫外燈，照射30分鐘。